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DiR碘化物
DiR碘化物
DiR iodide [1,1‘-dioctadecyl-3,3,3’,3‘-tetramethylindotricarbocyanine iodide]
规格:10mg
价格:¥1195.00
保存条件:-20°C干燥避光保存
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中文名称 DiR碘化物
英文名称 DiR iodide [1,1‘-dioctadecyl-3,3,3’,3‘-tetramethylindotricarbocyanine iodide]
Cat # 22070-10 mg 
规格 10mg  价格 ¥1,195.00 
分子量 1013.39 
Ex (nm) 748  Em (nm) 780 
溶剂 DMSO  贮存条件 -20°C干燥避光保存 
保质期 12个月  状态 现货 
分子结构式  

  DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS 细胞膜染料

  产品描述

  DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。

         * Omega滤光器由Omega公司提供(www. omegafilters.com);Chroma滤光器由Chroma公司提供(www. chroma.com)。

  **DiR的发射波长肉眼不可见,所以需要配备CCD镜头或其他的近红外检测仪器。

  使用方法

  1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备

  (1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。

  注意:未使用的储存液保存在-20 oC,避免反复冻融。

  (2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 µM的工作液。

  注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。

  2. 悬浮细胞染色

  (1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。

  (2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

  (3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。

  (4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。

  (5)重复(3),(4)步骤两次以上。

  3. 粘壁细胞的染色

  (1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

  (2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。

  (3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

  (4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

  (5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。

  4. 显微镜检测

  (1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。

  (2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

  a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

  b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

  c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005

  5. 流式细胞仪的检测

  DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。

  储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。

DiR碘化物
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